合适的软件功能对于ELISA定量测定同样很重要。有研究表明,四参数方程能较好地反映免疫测定的剂量反应曲线,*为适合于定量酶免疫测定的曲线拟合。因此,如目的是定量测定,则在酶标仪的软件功能中,要有这种曲线回归方程计算分析功能。其他诸如连点、直线等回归计算,则可根据酶标仪的应用目的而定,如兼用于微量生化测定,则此类回归计算就很有必要。此外,酶标仪兼做酶标动力学、凝集反应测定所需的软件是否应具备,当然也应根据使用目的而定。由于此类软件一般都较为昂贵,酶标仪常另外单独按需配备,如果不是实验室特殊需要,就不必强求这种软件功能。江西全自动酶标仪厂家直销酶标仪的检测速度是指其完成比色测定所需要的时间。
在用酶联免疫法测定抗原或抗体时,不论是定量试验还是定性试验都要求使用酶标仪进行测定。一般的酶标仪在测定中均有单波长和双波长的模式,并且采用的都是垂直光路。但在日常工作中有时会不太重视单波长和双波长的选择,对使用单、双波长给测定结果带来的较大差异也不很了解,***咱们就来了解一下这两个测量方法。酶标仪与分光光度计、自动生化分析仪等的吸光度测定有所不同,一般分光光度计是水平光路,而酶标仪则是垂直光路,但测定原理相同,都是使用朗伯-比耳定律,测定的都是样本的吸光度。垂直光的特点是标本吸光度受液体浓缩或稀释的影响小,不足之处是受被测样本液面是否水平、酶标板透光性、孔底是否平整等的影响较大。
血站实验室为筛检献血员血进行HBsAg、抗HCV和抗HIV等的ELISA测定时,常会遇到测定吸光度处于cut-off附近但又低于cut—off的血,按照试剂盒的标准,可判为阴性,血为合格血,可用于患者输血,但直觉告诉我们,这样的血如输给患者,导致输血后相应疾病发生的可能性较大,这是由ELISA现有的测定技术的不确定性所造成的,也就是ELISA测定的“灰区”的存在使得ELISA测定试剂盒cut-off的设定只是相对的准确,此时的假阳性和假阴性出现的可能性较低。因此,在血站筛检献血员血时,如以测定“灰区”的下限作为判断献血员血筛检不合格标准,就可以避免因“灰区”所致结果判断错误而引起输血后疾病发生的可能性。酶标仪可用于单克隆抗体筛分、凝血分灵敏度检验,以及其它需要进行比色的分析工作中。
一般酶标仪的测定波长在400~750nm或800nm之间,完全可以满足ELISA的显色测定。目前国内常见的ELISA试剂盒所使用的标记用酶均为辣根过氧化物酶(HRP),底物通常为四甲基联苯胺(TMB)和邻苯二胺(OPD),其在过氧化氢溶液的存在下,经HRP作用,分别氧化为2,2,—二氨基偶氮苯(DAB)和联苯醌。当pH值为5.0左右时,DAB在450nm波长处有比较大吸收,当pH值降为L 0时,比较大吸收波长移至492 nm,同时摩尔消光系数变大,显色加深,因而常用强酸如硫酸或盐酸终止反应。宝予德K3 Plus酶标仪波长范围是400-750nm,满足各种实验需求。重庆操作简便酶标仪样品检测
酶标仪是一种用途比较广的生物检验医疗设备,利用酶联免疫分析法,根据酶标记原理,进行定性或定量分析。北京双检测模式酶标仪酶联免疫
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