1)、初代培养：绣球外植体，将叶片剪去，自来水冲洗干净。在超净工作台上把已经冲洗干净的外植体浸入75％酒精中消毒30s，用无菌水冲洗3～4次。使用白猫漂白水和无菌水按1：4的体积比配制消毒液，将外植体放入消毒液浸泡40min，其中白猫漂白水为上海白猫(集团)有限公司生产的“白猫”牌家用漂白水。消毒完成，将外植体接种到诱导培养基中培养，建立无菌再生系统，诱导培养环境为光照强度1500lx条件下，温度25℃，光照时间16h；黑暗条件下，温度23℃，光照时间8h，培养6～8周。其中诱导培养基为ms+～～，诱导培养基的ph值为。(2)、继代培养：以建立的无菌再生系统为对象，将无菌外植体转接到增殖培养基，其中增殖培养基为ms+～～，培养环境为光照强度1500lx条件下，温度25℃，光照时间16h；黑暗条件下，温度23℃，光照时间8h，培养8～12周。每隔8～12周转接入新的增殖培养基，增殖培养基的ph值为。(3)、生根培养：经过继代培养的绣球组培苗，取2～3cm的顶芽，放入生根培养基，其中生根培养基为1/2ms+～～，生根培养基的ph值为。诱导培养环境为光照强度1500lx条件下，温度25℃，光照时间16h；黑暗条件下，温度23℃，光照时间8h，培养8～12周。。F12培养基支持多种细胞的生长和增殖。福建MEM a培养基有哪些

    将蒸过的原料置于室温下过夜，未被杀死的孢子便发芽生长，芽孢发育成营养细胞，再30min便可杀死。如此连续反复进行2-3次，亦可达到彻底**的目的。3、分批**的操作分批灭歇是在所用的发酵罐或其他培养装置中进行的，它是在配制罐中配好培养基后，通过**管道输入发酵罐等培养设备中，然后开始**。在进行培养基的间歇**之前，通常先将发酵罐等培养装置的分空气过滤器进行**，并且用空气将分过滤器吹干。开始**时，应先放去夹套或蛇管中的冷水，开启排气管阀，通过空气管向发酵罐内的培养基通入蒸汽进行加热，同时，也可在夹套内通蒸汽进行间接加热。当培养基温度升到70℃左右时，从取样管和放料管向罐内通入蒸汽进一步加热，当温度升至120℃，罐压为1*105Pa（表压）时，打开接种、补料、消泡剂、酸、碱等管道阀门进行排汽，当然在保温过程中，应注意凡在培养基液面下的各种进口管道都应通入蒸汽，而在液面以上的其余各管道则应排放蒸汽，这样才能不留死角，从而保证**彻底。保温结束后，依次关闭各排汽、进汽阀门，待罐内压力低于空气压力后，向罐内通入无菌空气，在夹套或蛇管中通冷水降温，使培养基的温度降到所需的温度，进行下一步的发酵和培养。贵州减血清培养基哪个好MEM培养基含有多种必需氨基酸和维生素，适合细胞培养。

    1/2cs生长培养基的培养结果为：马铃薯茎端在1/2cs生长培养基上的存活率为100％，培养16d的幼苗，表现为植株健壮、平均茎高、平均茎中粗为，叶色浓绿，根系发达、平均根数为8个。如图4所示。对比培养例4：将1/2cs基本培养基替换为1/2ms基本培养基，其余完全同培养实例4，1/2ms基本培养基的成分及用量如表1所示。1/2ms生长培养基的培养结果为：马铃薯茎端在1/2ms生长培养基上的存活率为100％，培养16d的幼苗，表现为植株健壮、平均茎高、平均茎中粗为，叶色浓绿，根系发达、平均根数为6个。如图4所示。培养实例4和对比培养例4的培养结果比较：马铃薯茎端在1/2cs生长培养基和1/2ms生长培养基上的存活率均为100％；在相同条件下培养16d时，与1/2ms生长培养基相比，1/2cs生长培养基中的幼苗长势更佳，其茎高、茎中粗、根的数量均优于1/2ms生长培养基。如图4所示。培养实例5：哥伦比亚型拟南芥叶片及根愈伤**诱导(1)拟南芥叶片愈伤**诱导培养基：cs基本培养基+，用超纯水溶解，。cs基本培养基的成分及用量如表1所示。(2)拟南芥根愈伤**诱导培养基：cs基本培养基+2,，用超纯水溶解，。cs基本培养基的成分及用量如表1所示。。

    体外动物细胞培养时需要大量谷氨酰胺，利用量常超过其他必须氨基酸利用量的总和。维生素是维持细胞生长的生物活性物质，在细胞代谢中起调节及控制作用。维生素可分为水溶性和脂溶性两类，水溶性维生素主要包括泛酸、维生素B12、叶酸、烟酰胺、吡哆醛、硫胺素、核黄素、维生素C、胆碱、肌醇等；脂溶性维生素主要包括维生素A、D、E、K等；有的培养液中还直接采用ATP和辅酶A；大部分培养基中还有生物素。许多维生素参与构成各种酶的活性基团的成分，没有它们，酶便没有活性，代谢活动将无法进行。比如，泛酸可以在细胞内转变成酰基载体蛋白和辅酶（如辅酶A），参与糖类、脂类和蛋白质代谢中的催化反应；维生素B12则在细胞内参与叶酸的合成和脂肪酸的合成等。不同配方的细胞培养基中维生素的浓度有较大差异。例如，DMEM培养基中维生素的含量约为MEM培养基的两倍，其原因是一方面不同种类维生素的作用不同，另一方面不同种类的细胞对维生素的需求也可能有较大差异，相应细胞培养基的配方中维生素的含量也可能不同。无机盐是细胞维持生命活动所不可缺少的营养成分，主要有Na+、K+、Ca2+、Mg2+、Cl－、PO43—、SO42—、HCO3－等，主要作用为维持细胞培养液渗透压平衡。无酚红培养基确保了实验结果的高度准确性。

    本氏***叶片及根愈伤**诱导的对比效果图，a：叶片愈伤**；b：叶片愈伤**诱导率；c：根愈伤**；d：根愈伤**诱导率；a和c中bar＝；图7是cs和ms两种培养基上，水稻成熟胚愈伤**诱导的对比效果图，a：水稻成熟胚愈伤**；b：水稻成熟胚愈伤**诱导率；a中bar＝；图8是用不同ph的超纯水(ph为)配制的cs、ms、1/2cs和1/2ms液体培养基ph值稳定性比较效果图；图9是在未调ph和将ph调至、ms、1/2cs和1/2ms液体培养基中马铃薯幼苗的生长状况的比较效果图，a：不同液体培养基培养前的无菌苗生长情况；b1、c1和d1：1/2ms未调ph液体培养基培养效果；b2、c2和d2：1/2cs未调ph液体培养基培养效果；b3、c3和d3：ms未调ph液体培养基培养效果；b4、c4和d4：cs未调ph液体培养基培养效果；b5、c5和d5：1/；b6、c6和d6：1/；b7、c7和d7：；b8、c8和d8：；a、b、c和d中bar＝；图10是对在未调ph和将ph调至、ms、1/2cs和1/2ms液体培养基中马铃薯幼苗的茎高(a)、茎中粗(b)、根长(c)、鲜重(d)进行统计的比较效果图。具体实施方式下面结合附图和实施例对本发明作进一步描述。实施例一，本实施例广适性植物**培养基，其每1000ml培养基中含有：kno32662mg、。DMEM培养基适用于多种哺乳动物细胞的体外培养和实验研究。重庆MEM a培养基代理商

RPMI1640培养基能够维持细胞的代谢活性。福建MEM a培养基有哪些

    另外，酚红作为pH值的指示剂被加入到细胞培养基中。酚红在产物纯化过程中会造成干扰，并且具有一定的固醇类***样作用，如雌***样作用。当用于哺乳类动物细胞的培养，可能会发生一些固醇类反应。现在商业化细胞培养基中的酚红含量可根据需求调整。因生物反应器具有pH在线检测技术，生物反应器培养动物细胞时，酚红可完全去除。细胞保护剂是保护细胞免受渗透压变化、剪切力、氧化及气泡作用等引起的损伤的物质。在使用生物反应器培养动物细胞时，细胞易被机械搅拌和通气鼓泡产生的流体剪切力和气泡作用所伤害甚至破损死亡。为降低这种损伤，除优化生物反应器结构和生产工艺外，可在细胞培养液中添加一些保护剂。其主要是通过改变细胞培养基物性或是对细胞具有保护作用的物质，常用的种类有血清、白蛋白、聚已二醇（PEG）、非离子性表面活性剂PluronicF68或是其他一些高分子聚合物等。3.细胞培养基的理化性质动物细胞在细胞培养基中不仅能存活，还要分裂增殖，合适的渗透压、pH值等理化性质是细胞培养基必须具备的前提条件。动物细胞大多数需要轻微的碱性条件，适宜pH在～。细胞培养基的pH值通常需经校正的pH计来测定。在细胞生长过程中，随细胞数量的增多和代谢活动的加强。福建MEM a培养基有哪些

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