叠氮钠血琼脂基础(AzideBloodAgarBase)是一种选择性培养基,主要用于从粪便、污水和其他样本中分离和检测链球菌和葡萄球菌。以下是它的一些特点和配制方法:**特点**:1.**成分**:含有胰蛋白胨、肉浸粉、氯化钠、叠氮钠和琼脂等成分,其中叠氮钠作为选择性抑制剂,对大多数革兰氏阴性菌具有抑制作用,但允许某些革兰氏阳性菌如链球菌和葡萄球菌的生长。2.**pH值**:培养基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),为细菌提供适宜的生长环境。3.**应用**:除了用于分离培养链球菌和葡萄球菌,叠氮钠血琼脂基础还可用于测定溶血反应。4.**溶血反应**:在该培养基上,可以观察到α溶血(培养基变绿)、β溶血(菌落周围培养基变透明)和γ溶血(培养基无变化)。**配制方法**:1.称取33.2g培养基粉末,加入1000mL蒸馏水或去离子水中。2.加热煮沸至完全溶解。3.121℃高压灭菌15分钟。4.冷却至50℃左右,加入50mL无菌羊血,混匀后倒入无菌培养皿中。**注意事项**:-避免摄入、吸入、皮肤接触叠氮钠,配制时应在通风橱中进行,并佩戴适当的个人防护装备。-培养基中含有的叠氮钠具有剧毒,应妥善处理和保存。CAS培养基广泛应用于细菌铁载体的筛选试验,特别是在研究植物根际促生菌和微生物与植物相互作用的领域 。ChapmanStone琼脂平板
支原体培养基基础(含精氨酸)是一种专门用于培养支原体的培养基,它包含精氨酸作为生长因子,适用于那些需要精氨酸才能生长的支原体,如口腔支原体等。以下是该培养基的一些特点和配制方法:1.**配方组成**:通常包含猪胃消化粉、牛肉浸粉、酵母浸粉、氯化钠、葡萄糖、L-精氨酸和酚红等成分。2.**配制方法**:-称取培养基粉末,按照说明书比例(通常是25.52g/L)溶解在蒸馏水中。-加热溶解并调节pH至7.1-0.2(25℃)。-121℃高压灭菌15分钟。-冷却至室温后,无菌操作下加入灭活小牛血清或马血清(通常为200mL)和青霉素(通常为80万单位)。-混匀后分装到无菌试管中备用。3.**用途**:主要用于药品和生物制品中支原体的检测,特别是口腔支原体的培养和检测。4.**培养条件**:通常在36℃±1℃的条件下培养7-14天。5.**观察指标**:培养基中的酚红作为pH指示剂,支原体生长时会因代谢产物改变培养基的pH值,导致颜色变化。例如,口腔支原体分解精氨酸产碱,使培养基颜色由橙色变为红色。6.**质量控制**:通过接种已知的质控菌株来验证培养基的灵敏度和有效性。DG-18琼脂培养皿SLB培养基主要由大豆蛋白胨和酪蛋白消化物组成,提供丰富的氮源和碳源,同时含有必需的维生素和生长因子。
改良亚硫酸盐琼脂(ModifiedSulfiteAgar)是一种用于微生物培养的培养基,具有以下特点:1.**用途**:主要用于食品中嗜热菌芽孢(包括需氧芽孢总数、平酸芽孢和厌氧芽孢)的分离培养和计数。2.**成分**:通常包含蛋白胨、无水亚硫酸钠和琼脂。具体配方为每升培养基含蛋白胨10.0克、无水亚硫酸钠1.0克、琼脂20.0克。3.**配制方法**:称取31.0g培养基粉末,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装试管,再于各试管内加入适量清洁的混铁粉或铁屑,不调pH,121℃高压灭菌20分钟,备用。4.**微生物灵敏度试验**:按标签用法制备培养基,接种质控菌株,放置于55℃厌氧培养48小时以验证培养基的性能。5.**加热灭菌**:在加热灭菌前,培养基成分应边搅拌边溶解于水中。灭菌时间通常要在121℃下保持15~20分钟,从中心温度达到121℃开始计算。6.**储存条件**:未提供具体储存条件,但一般培养基应密封保存于2-25°C的环境中。7.**注意事项**:避免摄入、吸入、皮肤接触,并确保在制备和使用过程中遵循适当的安全措施。改良亚硫酸盐琼脂因其特定的成分和用途,在食品卫生检验、医药、水质检测等领域有着广泛的应用。
使用TCBS琼脂进行细菌分离实验的步骤如下:1.**准备工作**:-确保实验室无菌操作条件,穿戴适当的实验服和手套。-准备无菌的接种环、涂布器、无菌吸管和移液器等工具。2.**配制培养基**:-按照培养基包装上的说明,称取适量的TCBS琼脂粉末。-将称取的TCBS琼脂粉末加入到适量的蒸馏水中,通常为100mL。-将混合物加热至沸腾,以确保琼脂完全溶解。3.**冷却和倾注平板**:-将溶解好的培养基冷却至50℃左右(避免过热,以免杀死细菌),此时琼脂应该仍然是液体状态。-将冷却的培养基倒入无菌的培养皿中,一般倾注量为15-20mL/平皿。-等待琼脂凝固,形成固体培养基平板。4.**接种样品**:-使用无菌操作,将待检测的样品涂布或划线接种到TCBS琼脂平板上。-可以使用稀释涂布法、螺旋接种法或其他适当的接种方法。5.**培养**:-将接种后的平板倒置,放入恒温培养箱中。-根据实验要求,通常在36±1℃下培养18-24小时。6.**观察和选择菌落**:-培养结束后,观察平板上的生长情况,记录不同类型菌落的特征。-选择性地挑选出特定的菌落,如蓝绿色或黄色菌落,这些可能是目标弧菌。
酪蛋白琼脂是一种专门用于微生物学研究的培养基,尤其适用于蜡样芽孢杆菌的酪蛋白分解试验。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:酪蛋白琼脂的基础成分包括酪蛋白、牛肉浸粉、氯化钠、磷酸氢二钾、琼脂和溴百里香酚兰。其中,酪蛋白作为主要的氮源和蛋白分解能力的指示剂,牛肉浸粉提供额外的氮源和维生素,氯化钠维持渗透压平衡,磷酸氢二钾作为缓冲剂,琼脂作为凝固剂,溴百里香酚兰作为pH指示剂。2.**pH值**:该培养基的pH值通常调节在7.4±0.1(25℃),以保证细菌在比较好pH环境下生长。3.**灭菌处理**:制备好的培养基需要进行121℃高压灭菌15分钟,以确保无菌。4.**使用方法**:称取一定量的培养基粉末,加入到1升蒸馏水中,加热至完全溶解,然后进行灭菌处理。冷却至适当温度后倒入培养皿中,待凝固后用于微生物的培养。5.**培养特征**:在酪蛋白琼脂上,蜡样芽孢杆菌能产生酪蛋白酶,分解酪蛋白,使菌落周围的培养基形成透明圈。这种透明圈的形成是鉴定蜡样芽孢杆菌的重要依据。同时,溴百里香酚兰的颜色变化(由绿变蓝)也有助于观察结果。6.**质量控制**:通过接种质控菌株并观察培养特征来验证培养基的质量。克氏双糖铁试验时间通常控制在18-24小时,以确保细菌发酵充分且不过度,避免影响判断结果。葡萄糖蛋白胨琼脂培养皿
除了用于血液和无菌体液标本的细菌培养,血液增菌培养基还可用于动物性食品中致病菌的检测研究。ChapmanStone琼脂平板
克罗诺杆菌筛选肉汤(CronobacterScreeningBroth,简称CSB培养基)是一种用于检测环境和食品中克罗诺杆菌的选择性培养基。克罗诺杆菌是一种重要的食源性的病原体,能够引起新生儿和婴儿的严重疾病,如坏死性小肠结肠炎、败血症和脑膜炎。以下是克罗诺杆菌筛选肉汤的一些特点和配制方法:1.**配方**:-蛋白胨:10.0g-牛肉浸粉:3.0g-氯化钠:5.0g-溴甲酚紫:0.004g-蔗糖:10.0g-万古霉素:0.01g-pH:7.4+/-0.2(25℃)2.**配制方法**:-称取28gCSB培养基粉末,用1000ml去离子水重悬。-在121°C下灭菌15分钟。-冷却至大约50°C时,加入万古霉素(每100ml培养基中加入1mg万古霉素)。-混匀后分装到无菌容器中。3.**工作原理**:-蛋白胨和牛肉浸粉提供氮源。-氯化钠维持渗透压平衡。-蔗糖作为克罗诺杆菌可发酵的糖类。-溴甲酚紫作为pH指示剂,其变色范围为pH5.2(黄色)至pH6.8(紫色)。-发酵蔗糖产酸,使得培养基的pH下降,溴甲酚紫由紫色变为黄色。4.**用途**:-CSB培养基用于检测环境和食品中的克罗诺杆菌。ChapmanStone琼脂平板
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