在生化研究工作中，常常需要使用缓冲溶液来维持实验体系的酸碱度。研究工作的溶液体系pH值的变化往往直接影响到研究工作的成效。如果“提取酶”实验体系的pH值变动或大幅度变动，酶活性就会下降甚至完全丧失。所以配制缓冲溶液是一个不可或缺的关键步骤。缓冲溶液是无机化学及分析化学中的重要概念，缓冲溶液是指具有能够维持PH相对稳定性能的溶液。pH值在一定的范围内不因稀释或外加少量的酸或碱而发生***的变化，缓冲溶液依据共轭酸碱对及其物质的量不同而具有不同的pH值和缓冲容量。此外,PBS缓冲液也可能会对皮肤产生一定的刺激性,长期使用可能会导致皮肤老化和干燥。四川PBS缓冲液进货价

    所有操作均应在通风橱中进行，与苯酚接触过的皮肤部位应用大量水清洗，并用肥皂和水洗涤，忌用乙醇。3.苯酚平衡：因为在酸性pH条件下DNA分配于有机相，因此使用苯酚前必须对苯酚进行平衡使其pH值达到，苯酚平衡操作方法如下：①液化苯酚应贮存于-20℃，此时的苯酚呈结晶状态。从冰柜中取出的苯酚首先在室温下放置使其达到室温，然后在68℃水浴中使苯酚充分融解。②加入羟基喹啉（8-Quinolinol）至终浓度。该化合物是一种还原剂、RNA酶的不完全抑制剂及金属离子的弱螯合剂，同时因其呈黄色，有助于方便识别有机相。③加入等体积的1MTris-HCl（)，使用磁力搅拌器搅拌15分钟，静置使其充分分层后，除去上层水相。④重复操作步骤③。⑤加入等体积的MTris-HCl（)，使用磁力搅拌器搅拌15分钟，静置使其充分分层后，除去上层水相。⑥重复操作步骤⑤，稍微残留部分上层水相。⑦使用pH试纸确认有机相的pH值大于。⑧将苯酚置于棕色玻璃瓶中4℃避光保存。苯酚/氯仿/异戊醇(25:24:1)配制方法：1.说明：从核酸样品中除去蛋白质时常常使用苯酚/氯仿/异戊醇（25:24:1)。氯仿可使蛋白质变性并有助于液相与有机相的分离，而异戊醇则有助于消除抽提过程中出现的气泡。海南PBS缓冲液常见问题PBS缓冲液的离子浓度与人体血液相似。

    Buffer组份浓度：137mMNaCl,mMKCl,10mMNa2HPO4,2mMKH2PO4配制量：1L配制方法：1.称量下列试剂，置于1L烧杯中。2.向烧杯中加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。3.滴加浓盐酸将pH值调节至，然后加入去离子水将溶液定容至1L。4.高温高压**后，室温保存。注意：上述Buffer中无二价阳离子，如需要，可在配方中补充1mMCaCl2和mMMgCl2。10M醋酸铵组份浓度：10M醋酸铵配制量：100ml配制方法：1.称量g醋酸铵置于100～200ml烧杯中，加入约30ml的去离子水搅拌溶解。2.加去离子水将溶液定容至100ml。3.使用mm滤膜过滤**。4.密封瓶口于室温保存。注意：醋酸铵受热易分解，所以不能高温高压**。Tris-HCl平衡苯酚配制方法：1.使用原料：大多数市售液化苯酚是清亮无色的，无需重蒸馏便可用于分子生物学实验。但有些液化苯酚呈粉红色或黄色，应避免使用。同时也应避免使用结晶苯酚，结晶苯酚必须在160℃对其进行重蒸馏除去诸如醌等氧化产物，这些氧化产物可引起磷酸二酯键的断裂或导致RNA和DNA的交联等。因此，苯酚的质量对DNA、RNA的提取极为重要，我们推荐使用高质量的苯酚进行分子生物学实验。2.操作注意：苯酚腐蚀性极强，并可引起严重灼伤，操作时应戴手套及防护镜等。

pH缓冲液的配制及其保存：1.pH标准物质应保存在干燥的地方，如混合磷酸盐pH标准物质在空气湿度较大时就会发生潮解，一旦出现潮解，pH标准物质即不可使用。2.配制pH标准溶液应使用二次蒸馏水或者是去离子水。如果是用于0.1级pH计测量，则可以用普通蒸馏水。3.配制pH标准溶液应使用较小的烧杯来稀释，以减少沾在烧杯壁上的pH标准液。存放pH标准物质的塑料袋或其它容器，除了应倒干净以外，还应用蒸馏水多次冲洗，然后将其倒入配制的pH标准溶液中，以保证配制的pH标准溶液准确无误。4.配制好的标准缓冲溶液一般可保存2—3个月，如发现有浑浊、发霉或沉淀等现象时，不能继续使用。5.碱性标准溶液应装在聚yi烯瓶中密闭保存。防止二氧化碳进入标准溶液后形成碳酸，降低其pH值。pH计校准的正确顺序是:先用pH7.0缓冲溶液校准,再用pH4.0或pH10.0缓冲溶液校准。

PBS 与 DPBSPBS 和 DPBS 都包括氯化钠和磷酸盐缓冲液，是生物学研究中常用的试剂，用于维持 pH 值，同时可大幅度地减少活细胞中的渗透压休克；然而，与 PBS 相比，DPBS 还包括氯化钾，配方中可含或不含钙和镁以及含或不含葡萄糖和**酸。根据您的具体应用选择 PBS 或 DPBS。

Dulbecco 的磷酸盐缓冲液（DPBS）DPBS 与 PBS 的不同之处在于它还包括氯化钾，并且提供多种配方。它也用于生物应用，水基缓冲液，包括氯化钠和磷酸盐缓冲液。

HBSS 与 EBSSHanks 的平衡盐溶液（HBSS）和 Earle 的平衡盐溶液（EBSS）都是等渗溶液，用于维持生物应用中的渗透压和 pH 值。虽然 HBSS 和 EBSS 包括葡萄糖和碳酸氢钠，用于短期维持生长培养基以外的细胞，但 EBSS 在 5% CO2 下使用，而 HBSS 包含较少的碳酸氢钠，可以在没有 CO2 的情况下使用。从各种依应用而定的配方中进行选择。 缓冲溶液在医学检验中有着重要的意义。四川PBS缓冲液进货价

试述缓冲溶液在实验中的作用？四川PBS缓冲液进货价

PH计校正的标准缓冲液有几种？

ph计校正常用的三种标准溶液：pH分别为4.0、7.0和10.0一般4.0的可以用邻苯二甲酸氢钾体系配制，7.0的用磷酸二氢钾-磷酸氢二钠体系配制，10.0的用碳酸钠-碳酸氢钠体系配制，可以根据需要的缓冲容量确定浓度。校正pH计所用工具和原料：标准缓冲液（应选择与供试液pH值接近的标准缓冲液），目前标准溶液有7种，在我国一般使用以下3种溶液：(pH值在25℃时)1)邻苯二甲酸氢钾(KHC8H4O4)pH4.003；0.05M2)混合磷酸盐(Na2HPO4)：磷酸二氢钾和磷酸氢二钠混合盐溶液pH6.864；0.025M3)硼砂(Na2B4O7·l0H2O)pH9.182；0.01M 四川PBS缓冲液进货价

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