普遍应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复等方面的研究。传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法需要DNA变性、抗原修复、抗原抗体过夜孵育等复杂繁琐的操作步骤。而EdU检测方法不需要剧烈的DNA变性，只需温和的细胞固定化和透化处理，能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点，操作步骤更加快速、灵敏和准确。EdU与胸腺嘧啶(T)结构非常相似，而EdU染料大小只有BrdU抗体的1/500,在细胞内很容易扩散，无需DNA变性(酸解、热解、酶解等)，可有效避免样品损伤，而且无需抗原抗体反应，能在细胞和组织水平更快速便捷地反映DNA复制活性上海东寰与您分享EdU细胞增殖检测试剂盒的重要性。上海品牌EdU细胞增殖检测试剂盒厂家

注：1）培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态；2）孵育时间至少2小时，可延长至24小时后再检测也可以。4、以1×PBS清洗细胞两次，每次5分钟，以除去未掺入RNA的EU残留。注：贴壁不牢的细胞可降低清洗强度。细胞的固定和通透1、每孔加入150μl细胞固定液，室温培养30分钟，弃固定液；注：1)该试剂盒配备了细胞固定液，也可以使用含4%多聚甲醛的PBS来进行细胞固定；2)如果使用其他的细胞固定剂建议用DEPC水来配置，避免RNA酶降解细胞内的RNA。2、每孔加入150μl2mg/ml甘氨酸，摇床孵育5分钟；3、弃甘氨酸溶液，每孔加入300μlPBS洗液，室温清洗5分钟；4、每孔加入300μlTritonX-100细胞通透液，室温通透10分钟，弃细胞通透溶液；5、每孔加入300μlPBS洗液，室温清洗5分钟；EU染色1、通过用10：1去离子水稀释10×反应缓冲液进行配制1×EU反应缓冲液；2、按照溶解200mg缓冲添加剂溶于1ml去离子水的比例称取适量的粉末进行溶解，即为可用的缓冲添加剂的浓度，建议现用现配；注：缓冲添加剂为白色粉末，较难准确称量，称量范围可稍微放宽，但是不应超过±20%，且该粉末较易氧化，使用后请旋紧管盖，如试剂出现棕黄色，则需报废或更换。上海品牌EdU细胞增殖检测试剂盒评价EdU细胞增殖检测试剂盒的原理是什么？上海东寰告诉您。

EdU（5-Ethynyl-2’-deoxyuridine）是一种胸腺嘧啶核苷类似物，能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶（T）渗入正在复制的DNA分子中，通过基于EdU与Apollo®荧光染料的特异性反应快速检测细胞DNA复制活性，适用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA修复、病毒复制、细胞标记示踪等方面的研究，尤其适合进行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他药物的筛选实验。与BrdU检测方法相比，EdU检测方法更快速、更灵敏、更准确。EdU与T非常相似，而EdU染料只有BrdU抗体的1/500，在细胞内很容易扩散，无需DNA变性（酸解、热解、酶解等），可有效避免样品损伤，而且无需抗原抗体反应，能在细胞和组织水平更准确地反映DNA复制活性~

通过以上原理图的对比，大家不难发现，EdU法检测细胞增殖，无须抗体，无变性步骤，保持细胞形态和DNA完整性，是一种简单，可靠，省事的创新方法。但是，现在依然有很多研究者们依然没有得到细胞增殖检测*行之有效，节约反应时间的方法。EdU（5-溴-2-脱氧尿嘧啶）试剂盒是一种嘧啶类似物，可以在DNA合成期整合入DNA双链。Abbkine的EdU检测试剂盒有两个型号，分别匹配的是两种不同的荧光通道，细胞增殖成像分析试剂盒（EdU法）(绿色荧光)，KTA2030，488通道；细胞增殖成像分析试剂盒（EdU法）(橘红色荧光)，KTA2031，549通道。上海东寰告诉您EdU细胞增殖检测试剂盒如何去使用呢？

本试剂盒包含EdU法检测所需要的所有组份，同时提供了蓝色细胞核染料Hoechst33342，可以用来复染所有细胞核，也可用于细胞周期分析。使用本试剂盒所做结果可以用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪或荧光酶标仪进行检测，也可以用于高内涵筛选(High-ContentScreening,HCS)。对6孔板培养的细胞（每孔500μl的Click反应液）、96孔板培养的细胞（每孔50μl的Click反应液）、每管细胞数量为10-100万的流式细胞仪检测（每管500μl的Click反应液）以及冰冻或石蜡切片的检测（每个样品100-200μl的Click反应液）EdU细胞增殖检测试剂盒使用时要考虑什么问题？上海品牌EdU细胞增殖检测试剂盒评价

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EdU法中的点击反应原理图。掺入到细胞DNA中的EdU与荧光探针或生物素等标记的叠氮化物，在铜离子的催化下发生共价反应，形成稳定的三唑环，使细胞DNA标记上荧光探针或生物素。细胞增殖检测是评估细胞活性、遗传毒性及抗药物效果等的基础实验手段。细胞增殖检测的方法按照原理通常可以分为五类：膜损伤检测、代谢活性检测、ATP水平测定、DNA合成检测和细胞荧光标记检测法。目前公认的精确的检测细胞增殖的方法是直接检测细胞中DNA的合成上海品牌EdU细胞增殖检测试剂盒厂家

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