蛋白质分离纯化步骤(二) 2.4.2 纤维素柱层析法 该法是利用蛋白质的酸碱性质作为分离的基础。离子交换纤维素(cellulose ion-exchanger)是人工合成的纤维素衍生物,它具有松散的亲水性网状结构,有较大的表面积,使蛋白质大分子可以自由通过。因此常用于蛋白质的分离。 (1)羧甲基纤维素(CM-纤维素) 在纤维素颗粒上带有羧甲基基团。在中性pH条件下,山东直销蛋白纯化系统上门维修,羧甲基上的质子可解离下来(图2-27a),而溶液中带正电荷的蛋白质分子可与纤维素颗粒上的羧甲基负电荷结合。可交换的基团带正电,因此是一种阳离子交换剂,山东直销蛋白纯化系统上门维修。蛋白质与离子交换纤维素之间结合能力的大小取决于彼此间相反电荷基团之间静电吸引。 (2)二乙氨基乙基纤维素(DEAE-纤维素) 在中性pH条件下,它含有带正电荷的基团,可与溶液中的带负电荷的蛋白质结合,可交换的基团带负电荷,山东直销蛋白纯化系统上门维修,因此是一种阴离子交换剂。当某一蛋白质混合溶液通过装有DEAE-纤维素的层析柱时,带正电荷的蛋白质不能结合而随着洗脱液的流动先被洗脱下来。带负电荷的蛋白质将被结合到柱上。结合力取决于彼此相反电荷基团间的静电吸引。然后选用一定pH和离子强度的缓冲液进行洗脱,改变蛋白质分子所带的静电荷,依次从层析柱流出达到相互分离的目的。
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