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北京DNA甲基化荧光定量PCR分析服务 **** 上海朝瑞生物科技供应

信息介绍 / Information introduction

SNP基因分型技术原理是PCR扩增含有SNP的基因组片段,主要特点是准确性高、灵活性强、通量大,主要方法是TaqMan探针法。TaqMan探针法 针对染色体上的不同SNP位点分别设计PCR引物和TaqMan探针,进行实时荧光PCR扩增,北京DNA甲基化荧光定量PCR分析服务。探针的5’-端和3’-端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团,北京DNA甲基化荧光定量PCR分析服务。当溶液中存在PCR产物时,该探针与模板退火,即产生了适合于核酸外切酶活性的底物,从而将探针5’-端连接的荧光分子从探针上切割下来,破坏两荧光分子间的PRET,北京DNA甲基化荧光定量PCR分析服务,发出荧光。通常用于少量SNP位点分析。

PCR检测方法在临床医学及实验室检验中**有价值的应用领域就是对***性疾病的诊断。理论上,只要样本有一个病原体存在,PCR方法就可以检测到。该方法对病原体的检测解决了免疫学检测的“窗口期”问题,常用于疾病的早期诊断,可判断疾病是否处于隐性或亚临床状态。

大量的荧光定量PCR研究资料表明,病原体数量与***性疾病病情的轻重程度、传染性及***效果均有相关性。因此,通过荧光定量PCR方法得到的检测结果,一定程度上可以准确反映疾病***的情况。

实时荧光定量PCR技术原理将荧光基团加入到PCR反应体系中,通过不断累积荧光信号从而使对PCR全程的实时监测实现,再根据标准曲线定量分析未知模板的方法,即是荧光定量PCR技术。在实时荧光定量PCR中,实时检测全程PCR扩增过程,按照反应时间和荧光信号的变化能够将一条曲线绘制成。混合模板DNA和有荧光素的Taqman探针,遵守聚合酶链反应规律使高温变性,低温复性,适温延伸的热循环完成,切断和模板DNA互补配对的Taqman探针,荧光素在反应体系中游离。荧光在特定光激发下发出,被扩增的目的基因片段随着循环次数的增加呈级增长,Ct值根据实时检测与之对应的随扩增而变化荧光信号强度求取出来,同时对照多个已知模板浓度的标准品,就能够使待测标本目的基因的拷贝数得出。

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