一般而言，荧光扩增曲线可以分成三个阶段：荧光背景信号阶段、荧光信号**扩增阶段和平台期。在荧光背景信号阶段，扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖，无法判断产物量的变化;在平台期，扩增产物已不再呈**级增加，PCR终产物量与起始模板量之间没有线性关系，无法计算起始模板拷贝数，上海基因突变荧光定量PCR检测服务。因此只有在荧光信号**扩增阶段，PCR产物量的对数值与起始模板量之间存在线性关系，上海基因突变荧光定量PCR检测服务，故选择在这个阶段进行定量分析。为了定量方便，上海基因突变荧光定量PCR检测服务，在实时荧光定量 PCR 技术中引入了几个重要的概念：扩增曲线、荧光阈值、CT值。

PCR检测方法在临床医学及实验室检验中**有价值的应用领域就是对***性疾病的诊断。理论上，只要样本有一个病原体存在，PCR方法就可以检测到。该方法对病原体的检测解决了免疫学检测的“窗口期”问题，常用于疾病的早期诊断，可判断疾病是否处于隐性或亚临床状态。

大量的荧光定量PCR研究资料表明，病原体数量与***性疾病病情的轻重程度、传染性及***效果均有相关性。因此，通过荧光定量PCR方法得到的检测结果，一定程度上可以准确反映疾病***的情况。

温度设置：在设置荧光 PCR 程序时，要仔细核对程序中的目标温度、恒温时间和循环次数等参数，参数设置不正确将直接影响 PCR 检测结果。延伸过程中要设置读取收集荧光信号，如不设置收集荧光，将无法保存试验数据，无法判定检测结果，造成试验失败 操作规范：在对样品进行核酸提取和实时荧光扩增时要规范操作，防止样品的交叉污染、 酶的降解、假阳性的出现 离心管、***头和 PCR 管均需要高压灭菌或使用商品化的无 污染的离心管、***头和PCR 管。核酸提取结束后应立即进行仪器扩增，提取的核酸不可长时间置于室温，易受空气中酶的降解，短期可保存于 －20 ℃冰箱，长期应保存于－70 ℃冰箱 

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