QX200 Droplet数字PCR(Digital PCR) 系统的应用领域: **生物标志物研究和拷贝数变异分析 以***的灵敏度和准确度测量**突变的变异程度,苏州标准数字PCR检测服务、检测稀有的 DNA 靶拷贝以及解析拷贝数变异状态。 病原体检测 精确地对靶 DNA 或 RNA 分子中的细微变化进行定量分析,从而检测和监测病原体,苏州标准数字PCR检测服务。 与新一代测序 无缝对接 无需使用标准曲线,苏州标准数字PCR检测服务,直接对 NGS 库执行***定量分析。 基因表达分析 可对少量 mRNA 和 miRNA 的细微变化进行准确及重复性较好的检测。 环境监测 使用 QX200 系统可测试多种环境样品,例如土壤和水。 食品检测 采用经过验证的 ddPCR 方法对转基因生物体 (GMO) 进行评估。
原**白表达是将植物、动物、微生物等的目的基因插入合适载体后导入大肠杆菌(E. coli)表达出大量目的蛋白。大肠杆菌用于表达重组蛋白有以下优点:易于生长和控制;易于培养,实验耗费少;可选择多种大肠杆菌菌株及与之匹配的具各种特性的质粒。可从质粒构建、基因表达、蛋白纯化等一系列服务。 原核表达载体系统有:pET系列;pGEX系列。
1. 目的基因获取:客户提供含有目的基因的质粒或PCR扩增或密码子优化全基因合成。 2. 载体构建:将目的基因克隆到合适的表达载体并测序验证。 3. 蛋白表达预实验:将表达质粒转化到***的E. coli表达菌株中。挑选3个阳性克隆于LB培养基中扩增并选择合适的条件,SDS-PAGE检测蛋白表达情况,筛选出合适菌株以及比较好表达条件。 4. 蛋白表达纯化: 纯化蛋白(可溶表达—亲和纯化 包涵体表达—变性复性),SDS-PAGE、Western blotting检测验证目标蛋白正确性。实验周期:6-8周。
数字PCR即Digital PCR(dPCR),它是是一种核酸分子精细定量技术。相较于qPCR,数字PCR可让你能够直接数出DNA分子的个数,是对起始样品的精细定量。数字PCR实际上是一个在模板DNA、引物(模板片段两端的已知序列)和四种脱氧核苷酸等存在的情况下,DNA聚合酶依赖的酶促合成反应,扩增的特异性取决于引物与模板DNA的特异结合。病原体检测精确地对靶 DNA 或 RNA 分子中的细微变化进行定量分析,从而检测和监测病原体。 无需使用标准曲线,直接对 NGS 库执行精细定量分析。
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