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北京基因突变荧光定量PCR实验技术服务 来电咨询 上海朝瑞生物科技供应

信息介绍 / Information introduction

实时荧光定量PCR(Real-Time PCR)技术是在PCR技术的基础上发展起来的核酸定量技术,北京基因突变荧光定量PCR实验技术服务,它是通过在PCR反应体系中加入荧光基团,北京基因突变荧光定量PCR实验技术服务,然后利用荧光信号的积累强弱实时监测整个PCR进程,通过标准曲线对未知的DNA模板进行定量,实现了PCR从定性到定量的飞跃,为快速准确地分析样本中的各类待检物质提供了崭新的技术工具,现在已被广泛应用于实验室及临床**标志物的检测。Real-Time PCR与传统的PCR技术相比其使用了荧光探针标记特定核酸从而提高了准确性;灵敏度提高故使用较少的样本量,从而减少了样本消耗殆尽的风险,在一小时左右即可出结果,简化了传统PCR方法;全封闭管分析,北京基因突变荧光定量PCR实验技术服务、利用电脑分析软件对PCR扩增产物的实时动态的检测和自动定量,定量动态范围高达五个数量级,且结果重现性较好,这也提高了检测的灵敏度和精密度。

荧光定量PCR(Flurogenic Quantitative Polymerase ChainReaction,FQ-PCR;real-time quantitative PCR, RT-qPCR or qPCR), 是1996 年由美国Applied Biosystems 公司推出的一种新定量试验技术,它是通过荧光染料或荧光标记的特异性探针,标记PCR产物进行实时监测反应,利用与之相适应的软件对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度

实时荧光定量PCR(Real-TimePCR)技术是在PCR技术的基础上发展起来的核酸定量技术,是1996年美国Applied

Biosystems公司推出,它是通过在PCR反应体系中加入荧光基团,然后利用荧光信号的积累强弱实时监测整个PCR进程,通过标准曲线对未知的DNA模板进行定量。

一般而言,荧光扩增曲线可以分成三个阶段:荧光背景信号阶段、荧光信号**扩增阶段和平台期。在荧光背景信号阶段,扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖,无法判断产物量的变化;在平台期,扩增产物已不再呈**级增加,PCR终产物量与起始模板量之间没有线性关系,无法计算起始模板拷贝数。因此只有在荧光信号**扩增阶段,PCR产物量的对数值与起始模板量之间存在线性关系,故选择在这个阶段进行定量分析。为了定量方便,在实时荧光定量 PCR 技术中引入了几个重要的概念:扩增曲线、荧光阈值、CT值。

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