这种技术称为免疫组织化学(immunohistochemistry)技术或免疫细胞化学(immunocytochemistry)技术。2、原理根据抗原抗体反应和化学显色原理,组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合,上海多色荧光免疫组化技术服务,再利用一抗与标记生物素、荧光素等的二抗进行反应,前者再用标记辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(AKP)等的抗生物素(如链霉亲和素等)结合,***通过呈色反应或荧光来显示细胞或组织中化学成分,上海多色荧光免疫组化技术服务,在光学显微镜或荧光显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产物,从而能够在细胞爬片或组织切片上原位确定某些化学成分的分布和含量。3,上海多色荧光免疫组化技术服务、分类1)按标记物质的种类,如荧光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶)、铁蛋白、胶体金等,可分为免疫荧光法、放射免疫法、免疫酶标法和免疫金银法等。2)按染色步骤可分为直接法(又称一步法)和间接法(二步、三步或多步法)。与直接法相比,间接法的灵敏度提高了许多。3)按结合方式可分为抗原-抗体结合,如过氧化物酶-抗过氧化物酶(PAP)法;亲和连接,如卵白素-生物素-过氧化物酶复合物(ABC)法、链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(SP)法等,其中SP法是比较常用的方法;聚合物链接,如即用型二步法。
80年代到90年代相继又有新的荧光素出现如R-藻红朊、B-藻红朊、C-藻青蛋白、cy2、cy3、cy5和cy7等均在流式细胞仪和激光共聚焦显微镜中广泛应用。由于免疫荧光组织化学的特异性,快速性和在细胞水平定位的准确性,已在免疫学、微生物学、病理学、**学以及临床检验等许多方面得到广泛应用,日益发挥重要作用。[1]免疫组织化学技术现状与展望编辑免疫荧光组织化学技术经过半个多世纪的不断改进和创新,已成为现代研究生物和医学的重要手段之一。由于免疫荧光技术与形态、机能相结合不断完善和发展,尤其是合成了多种新荧光素与抗体容易结合,且结合物稳定。可以和FITC结合进行免疫荧光组织化学双标记或三标记。至今,它已和亲合化学技术如SPA、Biotin以及avidin、ConA相结合,应用领域也日益扩大,又与现代的电子计算机、扫描电镜技术、共聚焦显微镜、荧光***细胞分类器(FACS)以及数码相机摄影技术的应用,使得快速性、简便性有了更大的提高,使得定量更加准确。90年代又开展了荧光原位末端标记和荧光原位杂交技术,使得应用范围更广。虽然免疫组织化学技术有了很大的发展,如免疫金银法、免疫胶体金法、SP、Evision二步法和CSA法,但由于它有自己独特的优点:特异性强。
收藏查看我的收藏0有用+1已投票0免疫组化编辑锁定讨论免疫组化,是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及相对定量的研究,称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。中文名免疫组化外文名immunocytochemistry应用免疫学基本原理称为免疫组织化学技术目录1基本原理2分类3作用▪标本▪抗体▪常用染色方法4操作步骤▪操作步骤▪化染色步骤5判定分析6意义▪免疫组化镜检▪细胞凋亡检测▪关于掉片7经验总结▪实验为例▪免疫个人感悟免疫组化基本原理编辑抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性,免疫组织化学正是利用了这一原理。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来,以此作为抗原或半抗原,通过免疫动物后获得特异性的抗体,再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与抗体的复合物是无色的,因此还必须借助于组织化学的方法将抗原抗体结合的部位显示出来,以其达到对组织或细胞中的未知抗原进行定性,定位或定量的研究。
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