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北京四步完成RNA提取试剂盒信赖推荐 来电咨询 上海朝瑞生物科技供应

信息介绍 / Information introduction

用于各种植物、动物、微生物的RNA提取,在每个试剂盒里都有一份说明使用说明书。实验者只需要按照说明书上的步骤操作即可。使用时无需配制其它试剂,非常方便,适合于RNA的快速提取。所提取的RNA完整性好,北京四步完成RNA提取试剂盒信赖推荐、纯度高,可用于分子生物学后实验。但较好的试剂盒价格比较贵,在实验室可以根据自己的实验需要来定夺试剂盒的使用。

一般包括:成分数量储藏温度有效期裂解液100ml2-8℃一年漂洗液30mlRT一年洗柱液100mlRT一年RNasefreeddH2O30mlRT一年RNasefree吸附柱100个RT一年RNasefree收集管(2ml)100个RT一年此外,北京四步完成RNA提取试剂盒信赖推荐,还配有一份试剂盒使用说明书,根据不同的生产商,北京四步完成RNA提取试剂盒信赖推荐,可能还配有不同的试剂,如:DNA酶、溶菌酶等。

动物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织加1ml裂解液,用组织研磨杵或匀浆器匀浆处理。

贴壁细胞:直接在培养板中加入裂解液裂解细胞,每106细胞加1ml 裂解液。用取样器吹打混匀。

 细胞悬液:离心收集细胞。每106动物、植物和酵母细胞或每107细菌细胞加1ml裂解液混匀。

血液处理:取0.2-1ml新鲜血液加3倍体积红细胞裂解液,混匀后室温放置10分钟,10000rpm离心1分钟。弃上清,若沉淀含有红细胞,可加入2倍体积红细胞裂解液重复裂解步骤。离心后沉淀加入1 ml裂解液混匀。

将处理后的样品在室温放置5分钟,使得核酸蛋白复合物完全分离。

Trizol法提取RNA实验步骤及原理

1.在提取组织RNA时,每50~100mg组织用1mL Trizol试剂对组织进行裂解;提取细胞RNA时,先用PBS洗涤/离心沉淀细胞,每5-10 ╳106个细胞加1mL Trizol后, 反复用吹打或剧烈振荡以裂解细胞.


2、将组织或细胞的Trizol裂解液转入EP管中, 在室温15~30℃下放置5分钟;在EP管中,按照每1mL TRIZOL加0.2mL氯仿的量加入氯仿(即为1/5体积), 盖上EP管盖子, 在手中用力震荡15秒(10次), 在室温下(15℃~30℃)放置2~3分钟后, 14000rpm(4℃)离心15分钟.

【注:离心后分为3层,RNA在上层水相, DNA在中间层, 蛋白质在下层有机相】


3、取上层水相置于新EP管中(~500uL, 用200uL的黄色*头小心吸取, 约吸取3次, 杜绝取到中间层/下层), 按照每1mL Trizol加0.5mL异丙醇的量加入异丙醇(即为1/2体积), 4℃下静置20分钟, 沉淀RNA;14000rpm(4℃)离心15分钟.

 

4、按照每1mL TRIZOL加1mL75%乙醇进行洗涤(即为1倍体积, 注:用DEPC水配置75%乙醇), 混合(#用移液器轻轻吹打即可,不用将沉淀打碎), 14000rpm(4℃)离心20分钟, 弃上清(#比较好用真空泵吸去上清);让沉淀的RNA在室温下自然干燥(#或在超净台中小风吹干,比较好置于干净的环境中,防止灰尘杂质进入);用45uL Rnase-free water 溶解RNA沉淀.

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