使用时一定要根据自己的实验需要购买**提取试剂盒, 如果不是**试剂盒,或许能提出RNA,上海新手RNA提取试剂盒50T/690元,但不能确保其质量以及完整性,会影响RT-PCR、Northern blot、Dot blot、Real time RT PCR、芯片分析、polyA 筛选、体外翻译,上海新手RNA提取试剂盒50T/690元、RNase 保护分析、分子克隆等后续实验的结果。当前提取效果好的是RNA提取试剂盒,但其售价较高,单次实验费用花费太大,对精度要求不高的实验没有必要购买,当然还有其它的进口试剂盒,但是均存在价格高、订货周期长的问题(如果碰上国内无货的时候,上海新手RNA提取试剂盒50T/690元,要从国外发货,会等很长一段时间)。普通的提取实验用国产的试剂盒就足以,价格不高,基本上各地均有现货
操作快速:**快10分钟即可获得高质量的总RNA提取纯度高:不含基因组DNA污染,不需DnaseI酶处理产量高:很大程度地获得样品中的RNA室温条件下完成总RNA提取
RNAExpress Lysis Buffer于4 ℃避光保存,其他溶剂及吸附柱室温保存。
在漂洗液RWB中加入指定量的无水乙醇(分析纯),在试剂瓶上标注出,使用完毕后要拧紧试剂瓶,防止乙醇挥发。
洗脱缓冲液REB中不含有EDTA,一般情况不影响下游实验。
产品组成组成成分50 PrepsRNAExpress Lysis Buffer150 ml漂洗液 RWB2(RNase-Free)10ml (另外添加40ml无水乙醇)洗脱液 REB3(RNase-Free)3 ml离心吸附柱(NcmSpin Column, Rase-Free)含收集管50 个
RNA/DNA pull-down是检测RNA/DNA结合蛋白与其靶RNA/DNA之间相互作用的主要实验手段之一。用生物素标记RNA/DNA 探针,与胞浆蛋白提取液孵育,形成RNA/DNA—蛋白质复合物。该复合物可与链亲和素标记的磁珠结合从而与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后,通过Western Blot实验检测特定的RNA/DNA结合蛋白是否与RNA/DNA相互作用,还可以对该蛋白进行质谱(MS)鉴定蛋白质类型。
1.根据基因序列进行DNA序列T克隆, 体外转录RNA,进行生物素标记制备RNA探针或直接合成DNA生物素探针,3.细胞裂解液制备 ,4.探针与总蛋白裂解液 pull-down互作结合蛋白,5. 对结合蛋白进行纯化与分析(WB及蛋白质谱分析)。
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