实时荧光定量PCR(Real-Time PCR)技术是在PCR技术的基础上发展起来的核酸定量技术,它是通过在PCR反应体系中加入荧光基团,然后利用荧光信号的积累强弱实时监测整个PCR进程,通过标准曲线对未知的DNA模板进行定量,上海病原微生物荧光定量PCR分析服务,上海病原微生物荧光定量PCR分析服务,实现了PCR从定性到定量的飞跃,为快速准确地分析样本中的各类待检物质提供了崭新的技术工具,现在已被广泛应用于实验室及临床**标志物的检测。Real-Time PCR与传统的PCR技术相比其使用了荧光探针标记特定核酸从而提高了准确性;灵敏度提高故使用较少的样本量,从而减少了样本消耗殆尽的风险,在一小时左右即可出结果,简化了传统PCR方法;全封闭管分析、利用电脑分析软件对PCR扩增产物的实时动态的检测和自动定量,定量动态范围高达五个数量级,上海病原微生物荧光定量PCR分析服务,且结果重现性较好,这也提高了检测的灵敏度和精密度。 上海病原微生物荧光定量PCR分析服务
荧光染料可与双链DNA结合,每个循环的延伸阶段,染料掺入双链DNA中,其荧光信号强度与PCR产物的数量呈正相关。同时,其缺点也在于其非特异性。当PCR反应中有引物二聚体或者非特异性扩增时,该染料也可以和这些非特异性扩增产物结合,发出荧光,从而干扰对特异性产物的准确定量。
常用的染料为SYBR Green I,各公司针对荧光信号强度、***作用等进行改进,也推出了很多新的染料供大家选择。
Promega采用新型荧光染料BRYT Green® Dye,对qPCR反应没有***作用,与双链DNA结合后荧光信号更强. 北京单核苷酸多态性SNP荧光定量PCR检测服务
在使用具有相同 ROX 水平的两种预混液的一次检测中获得的原始荧光数据。信号差异是由预混液的成分造成的。使用 Applied Biosystems™ VIC™/MGB 探针在 Applied Biosystems™ 7900HT 快速实时荧光定量 PCR 系统上执行此反应。x 轴显示荧光基团的的发射波长,y 轴显示发射强度。
任何分子的荧光发射都受环境因素的影响,比如溶液的 pH 值和盐浓度。图 2 显示某个 Applied Biosystems™ TaqMan® 探针在两种不同预混液背景下的原始荧光数据。请注意,尽管两组反应的靶标、探针和 ROX 染料浓度都相同,预混液 A 中的荧光强度更高
实时荧光定量PCR具有灵敏度高、特异性高和精确性高的优点,此项技术已被应用于分子生物学、医学、食品检测和环境监测等多个领域 。在分子生物学领域的研究应用 定量核酸浓度:传统方法是用琼脂糖凝胶电泳或者分光光度计测定核酸浓度,其结果不准确而且易污染,实时荧光定量PCR可以解决这些问题,它的准确性、灵敏度高且无污染,对一些传染性疾病进行定量分析、病原微生物和***含量检测,此项技术都是优先
研究基因表达:应用实时定量PCR技术可以对基因时间、空间表达水平差异进行比较。例如,对特定基因用物理、化学、***等不同方法处理后的差异进行比较,为人们的科学研究提供依据
SNP基因分型技术原理是PCR扩增含有SNP的基因组片段,主要特点是准确性高、灵活性强、通量大,主要方法是TaqMan探针法。TaqMan探针法 针对染色体上的不同SNP位点分别设计PCR引物和TaqMan探针,进行实时荧光PCR扩增。探针的5’-端和3’-端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。当溶液中存在PCR产物时,该探针与模板退火,即产生了适合于核酸外切酶活性的底物,从而将探针5’-端连接的荧光分子从探针上切割下来,破坏两荧光分子间的PRET,发出荧光。通常用于少量SNP位点分析。上海病原微生物荧光定量PCR分析服务
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PCR检测方法在临床医学及实验室检验中**有价值的应用领域就是对***性疾病的诊断。理论上,只要样本有一个病原体存在,PCR方法就可以检测到。该方法对病原体的检测解决了免疫学检测的“窗口期”问题,常用于疾病的早期诊断,可判断疾病是否处于隐性或亚临床状态。
大量的荧光定量PCR研究资料表明,病原体数量与***性疾病病情的轻重程度、传染性及***效果均有相关性。因此,通过荧光定量PCR方法得到的检测结果,一定程度上可以准确反映疾病***的情况。 上海病原微生物荧光定量PCR分析服务
上海朝瑞生物科技有限公司创建于2003-01-22,注册资金 700-1000万元,是一家专注1.发布科研技术 2.发布应用技术 3.发布专业专长 4.发布科研成果 5.发布我的需求 6.发布筛选检验检测服务 7.发布协同代研发服务 8.发布升级改造产品服务 9.发布实验室及仪器设备共享 10.发布培训基地共享 11.发布工厂代加工及共享车间 12.发布科研/项目团队招聘13.发布研究生婚恋 14.发布项目整包服务 15.发布资源交换业务的公司。目前我公司在职员工达到5~10人人,是一个有活力有能力有创新精神的高效团队。公司业务范围主要包括:[ "科研技术服务", "应用技术服务", "科研成果转化", "科学产品销售" ]等。公司奉行顾客至上、质量为首、的经营宗旨,深受客户好评。目前公司已经成为[ "科研技术服务", "应用技术服务", "科研成果转化", "科学产品销售" ]的**企业,正积蓄着更大的能量,向更广阔的空间、更***的领域拓展。
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