RNA 完整性检测

       取 1 µl RNA 加入适当 RNA loading buffer，混匀，进行电泳检测。若出现清晰的三条带，分别为 28S、18S 和 5S，且条带之间界限清晰，就证明 RNA 样品的完整性非常好。可参考以下图示：

RNA 纯度检测

    利用分光光度计或者NanoDrop 仪检测RNA 样品在260nm、280nm 处的OD 值， 并计算 A260/A280 的比值。纯的 RNA 的比值应在 2.0 左右。

提取到的 RNA 得率很低。可能的原因如下：

样品裂解或匀浆处理不彻底。

RNA 沉淀条件和时间太短，没有充分沉淀 RNA 造成 RNA 损失，江苏 RNA提取试剂盒QQ 804036498，江苏 RNA提取试剂盒QQ 804036498，江苏 RNA提取试剂盒QQ 804036498。

***得到的 RNA 沉淀未完全溶解。

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纳米催化燃烧发电技术使得燃料可以充分燃烧，无需点火过程，无需任何机械运动部件就可以在纳米尺度下将热能直接转化为电能。燃烧所释放的能量，其单位质量输出的功率是传统使用的化学电池的几十倍，从而**提高了能源利用率，更重要的是此反应的生成物是***的二氧化碳和水，是一种全新的燃烧方式。此发明已经获得了美国发明专利“Solid state transport-based thermoelectric converter”,US 7696668。已经**完成了***代NanoEPower的结构测试和芯片的设计制造，在一块邮票大小的硅片上集成了上千个微米级发电单元，纳米催化低温燃烧发电的概念已经完成了实验室原理验证。北京新手RNA提取试剂盒500T/5865元其价格比进口试剂盒要便宜许多，且效果还不错，性价比还可以。

缓慢加入0.5 倍体积无水乙醇，混匀(此时可能会出现沉淀)。将得到溶液和沉淀一起转入纯化柱中，4℃ 12,000 rpm (~13,400×g)离心30 s，若一次不能将全部溶液和混合物加入纯化柱，请分两次转入纯化柱中，4℃ 12,000 rpm (~13,400×g)离心30 s，弃掉收集管中的废液。

向纯化柱中加入500 μl 溶液 RPI(使用前请先检查是否已加入乙醇)，4℃ 12,000 rpm (~13,400×g)离心30 s，弃废液。

 向纯化柱中加入500 μl 溶液 RW(使用前请先检查是否已加入乙醇)，室温静置2 min，4℃ 12,000 rpm (~13,400×g)离心30 s，弃废液。

 向纯化柱 中加入500 μl 溶液 RW，室温静置2 分钟，4℃ 12,000 rpm(~13,400×g)离心30 s，去除残余液体。

将纯化柱入2ml 收集管中，4℃ 12,000 rpm (~13,400×g)离心2 min，去除残余液体。

用于各种植物、动物、微生物的RNA提取，在每个试剂盒里都有一份说明使用说明书

将处理后的样品在室温放置5分钟，使得核酸蛋白复合物完全分离。

向匀浆样品中加0.2ml氯仿，盖好管盖，剧烈振荡15秒，室温放置3-5分钟

 2-8℃ 12000rpm离心10分钟。RNA主要在上层无色的水相中，把水相转移到新管中，不要吸到沉淀。

吸附柱前处理：在吸附柱中加入500ul 洗柱液，室温放置2分钟，2-8 12,000 rpm ℃ 离心2min，弃废液。第4步收集的上清中加入200ul无水乙醇混匀，加入吸附柱静置2分钟，2-8 12000rpm ℃ 离心2min，弃废液。

所有相关器皿耗材都应为RNase-free产品，操作过程要小心，带口罩、手套避免环境中RNA酶污染样品。

RNA提取注意事项（5）

纯化得到的RNA可能需要通过沉淀来浓缩，以满足一些下游应用的需要。醋酸铵(NH4OAc) 沉淀（加0.1体积的5 M 醋酸铵、2-2.5体积的无水乙醇，-20°C放置25分钟以上）可以很好地回收RNA。如果需要定量回收低浓度的RNA（ng/ml），可以采用共沉淀（如linear acrylamide糖原glycogen,、酵母yeast RNA ）的方法。核酸助沉剂是linear acrylamide，当RNA用于RT-PCR分析时，线性的丙烯酰胺和DNase处理的糖原都可以作为理想的共沉淀剂，因为它们都不含DNA污染，糖原含量高会制抑PCR反应。酵母RNA和未处理的糖原会给样品带来核酸污染，有可能影响RT-PCR的结果。沉淀后，注意避免RNA沉淀过分干燥，因为这可能导致很难重新溶解。

室温放置5min，12000rpm室温离心2min 即得到RNA。江苏四步9分钟完成RNA提取试剂盒****

价格不高，基本上各地均有现货，如天根（国内生产的试剂盒中销售面比较广的一种）等。江苏 RNA提取试剂盒QQ 804036498

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