通用RNA提取试剂盒是经过改进开发的新一代产品,提高了裂解液的裂解能力和提取的灵敏度,同时通过可在特定适宜的条件下特异、可逆地结合RNA,而各种蛋白质和其他杂质均可被去除掉对硅基质膜的改进增强了对RNA的吸附能力,得到的RNA 纯度更好,质量更高。该试剂盒可从各种细胞或组织中快速提取总RNA,每个吸附柱每次可处理50–100 mg 组织或5×106 细胞,可同时处理大量不同样品。一个小时内即可完成反应,提取的总RNA 没有DNA 和蛋白的污染,可用于Northern blot,北京 RNA提取试剂盒50T/690元QQ 804036498、Dot blot,北京 RNA提取试剂盒50T/690元QQ 804036498、polyA 筛选、体外翻译、RNase 保护分析和分子克隆。用于各种植物,北京 RNA提取试剂盒50T/690元QQ 804036498、动物、微生物的RNA提取。北京 RNA提取试剂盒50T/690元QQ 804036498
RNA提取注意事项(1):
迅速灭活内源的RNA酶,以防止RNA降解。 以下3个方法均可有效使内源RNA酶失活: 1)用含离液(如胍盐)的细胞裂解液收获样品,并立即匀浆。 2)用液氮瞬间冻结样品。值得特别注意的是:组织块必须保证足够小,在浸入液氮的瞬间就能冻结,以确保瞬间令RNA酶失活。3)立即将样品置于RNAfixer无液氮RNA样品储存液中。它是一种水相、的收集试剂,能立即稳定并保护完整、未冻结的组织和细胞样品中的RNA。关键要点是组织样品切片一定要够薄(<0.5 cm),这样RNAfixer才能在RNase破坏RNA之前迅速渗入组织块中。 北京 RNA提取试剂盒50T/690元QQ 804036498向吸附柱中加入600ul漂洗液,2-8 12,000 rpm ℃ 离心2min,弃废液。
当今的电子产品想要存储数据,无非是通过两类途径:***类是易失性存储,例如计算机的内存,掉电后数据会立即消失;第二类是非易失性存储,比如人们常用的U盘,在写入数据后无需额外能量可保存信息10年。然而,这两类存储技术各有各的问题。易失性存储速度快,但是保存期限短。非易失性存储虽能满足数据存储年限的要求,可写入速度却足足慢了几千倍。新型电荷存储技术已经可以达到10纳秒的数据写入速度。这意味着,其传输速度比普通U盘快了近乎一万倍,数据刷新时间也是内存技术的156倍。与此同时,数据在写入之后保存年限非常久。即使无外界能量输入,信息也可以保存10年。不仅如此,数据的存储时长甚至实现了按需定制:人们可以自主设置数据信息在设备中的存储时间,最短10秒,最久10年,过期就自动消失。这些全新特性不仅在高速内存中可以极大降低存储功耗,同时还可以实现数据有效期截止后自然消失,在特殊的保密场景中有极大的应用价值。
蛋白和多糖污染可能的原因如下:
样品中蛋白和多糖含量高,建议加入氯仿之前先高速离心去除蛋白和多糖。
吸取上层无色水相时不小心吸入一些中间蛋白层的物质,建议将移液***头中的液体放回分层的离心管中,重新进行离心后再小心吸取上层水相即可。
样品量太大,裂解不完全也会导致 RNA 样品中蛋白和多糖污染。
A260/A280 的比值低于 1.65
可能的原因如下:1、RNA 样品溶于 TE 溶液,低离子浓度和低 pH 条件下,A280 的数值会较高, 导致比值低。
样品匀浆时加的 Trizol 试剂量太少。
匀浆后样品未在室温放置 5 分钟,会导致蛋白的析出不完全,也会增加 A280的数值。
***得到的 RNA 沉淀溶解不完全。
当前提取效果好的是RNA提取试剂盒,但其售价较高,单次实验费用花费太大。
缓慢加入0.5 倍体积无水乙醇,混匀(此时可能会出现沉淀)。将得到溶液和沉淀一起转入纯化柱中,4℃ 12,000 rpm (~13,400×g)离心30 s,若一次不能将全部溶液和混合物加入纯化柱,请分两次转入纯化柱中,4℃ 12,000 rpm (~13,400×g)离心30 s,弃掉收集管中的废液。
向纯化柱中加入500 μl 溶液 RPI(使用前请先检查是否已加入乙醇),4℃ 12,000 rpm (~13,400×g)离心30 s,弃废液。
向纯化柱中加入500 μl 溶液 RW(使用前请先检查是否已加入乙醇),室温静置2 min,4℃ 12,000 rpm (~13,400×g)离心30 s,弃废液。
向纯化柱 中加入500 μl 溶液 RW,室温静置2 分钟,4℃ 12,000 rpm(~13,400×g)离心30 s,去除残余液体。
将纯化柱入2ml 收集管中,4℃ 12,000 rpm (~13,400×g)离心2 min,去除残余液体。 取新鲜或-70℃冻存100mg**加1ml裂解液,用**研磨杵或匀浆器匀浆处理。江苏新手RNA提取试剂盒信赖推荐
在每个试剂盒里都有一份说明使用说明书。北京 RNA提取试剂盒50T/690元QQ 804036498
意:此步骤目的是将纯化柱中残余的漂洗液去除,离心后将纯化柱在室温放置片刻,或置于超净工作台上通风片刻,以充分晾干。如果有漂洗液残留,可能会影响后续的RT等实验操作。
将纯化柱转入一个新的离心管中,加30–100 μl RNase-free ddH2O,室温放置2 min,4℃ 12,000 rpm (~13,400×g)离心2 min。
洗脱缓冲液体积不应少于30 μl,体积过小影响回收效率。且RNA应保存在-70℃,以防降解。
注意:如果想提高RNA得率,可重复上步操作一次,合并两次得到的溶液。 北京 RNA提取试剂盒50T/690元QQ 804036498
上海朝瑞生物科技有限公司创立于2003-01-22,是一家服务型公司。公司业务分为[ "科研技术服务", "应用技术服务", "科研成果转化", "科学产品销售" ]等,目前不断进行创新和服务改进,为客户提供质量的产品和服务。公司秉持诚信为本的经营理念,在化工深耕多年,以技术为先导,以自主产品为重点,发挥人才优势,打造化工质量品牌。公司凭借深厚技术支持,年营业额度达到2000-3000万元,并与多家行业出名公司建立了紧密的合作关系。
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