RNA 常用提取方法（1）
1、异硫氰酸胍氯化铯超速离心法:
原理：使用蛋白质变性剂异硫氰酸胍有效制抑RN A 酶的活性，经过起始密度为1.78g/m l 的氯化铯介质，进行密度梯度超速离心，RNA沉淀于管底，而DNA与蛋白质在上清中。使用这种方法，不但能得到高质量的RNA ，而且能同时分离出细胞染色体DNA。
2、盐酸胍-有机溶剂法：
原理：本法有MacDonald1987年在Strohman报道的方法基础上改进而成的，适用于没有超速离心及设备的情况下提取细胞总RNA。它利用盐酸胍制抑RNA酶，匀浆裂解细胞，有机溶剂抽提去除蛋白质,通过选择性沉淀RNA分子而去除DNA。
3、氯化锂-尿素法：
原理：本法首先由Auffray报道,利用高浓度尿素变性蛋白质同时制抑RNA酶，江苏快速RNA提取试剂盒50T/690元，江苏快速RNA提取试剂盒50T/690元，3 mol/L LiCl选择性沉淀RNA。
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向匀浆样品中加0.2ml氯仿，盖好管盖，剧烈振荡15秒，室温放置3-5分钟。
2-8℃ 12000 rpm离心10分钟。RNA主要在上层无色的水相中，把水相转移到新管中，不要吸到沉淀。
吸附柱前处理：在吸附柱中加入500ul 洗柱液，室温放置2分钟，2-8℃ 12,000 rpm离心2min，弃废液。
第4步收集的上清中加入200ul无水乙醇混匀，加入吸附柱静置2分钟，2-8℃ 12000rpm离心2min，弃废液。
向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，2-8℃ 12,000 rpm离心2min，弃废液。
向吸附柱中加入600ul漂洗液，2-8℃ 12,000 rpm离心2min，弃废液。 北京四步完成RNA提取试剂盒***的选择些年，我国基因检测市场快速发展。
本实用新型公开了RNA提取试剂盒，涉及生物技术领域。本实用新型包括盒盖和盒体，盒体为圆柱形结构，盒体内通过横板分隔为试剂腔和容纳腔，试剂腔内设有试剂存放盒，试剂存放盒内设有固定层，固定层上均匀开设有若干个与试剂瓶相配合对应的容器孔，固定层上设置有与容器孔相配合对应的标签槽，标签槽中设置标签，容纳腔内设有***抽盒和第二抽盒，***抽盒滑动设置在盒体内，第二抽盒滑动设置在盒体内，***抽盒为工具箱，第二抽盒为试剂箱，盒盖一表面设有提手。本实用新型通过设计圆柱形结构的盒体，盒体内置倾斜的固定层和相对应的标签槽以及提手结构，解决了现有的试剂盒空间利用率不高，试剂管容易混淆，不易携带的问题。
动物组织：取新鲜或-70℃冻存100mg组织加1ml裂解液，用组织研磨杵或匀浆器匀浆处理。
贴壁细胞：直接在培养板中加入裂解液裂解细胞，每106细胞加1ml 裂解液。用取样器吹打混匀。
细胞悬液：离心收集细胞。每106动物、植物和酵母细胞或每107细菌细胞加1ml裂解液混匀。
血液处理：取0.2-1ml新鲜血液加3倍体积红细胞裂解液，混匀后室温放置10分钟，10000rpm离心1分钟。弃上清，若沉淀含有红细胞，可加入2倍体积红细胞裂解液重复裂解步骤。离心后沉淀加入1 ml裂解液混匀。
将处理后的样品在室温放置5分钟，使得核酸蛋白复合物完全分离。 基层医疗地区缺乏专业设备和技术人员，样本采集完成之后，需要邮寄至大型医院或实验室。
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蛋白和多糖污染可能的原因如下：
样品中蛋白和多糖含量高，建议加入氯仿之前先高速离心去除蛋白和多糖。
吸取上层无色水相时不小心吸入一些中间蛋白层的物质，建议将移液***头中的液体放回分层的离心管中，重新进行离心后再小心吸取上层水相即可。
样品量太大，裂解不完全也会导致 RNA 样品中蛋白和多糖污染。
A260/A280 的比值低于 1.65
可能的原因如下：1、RNA 样品溶于 TE 溶液，低离子浓度和低 pH 条件下，A280 的数值会较高， 导致比值低。
样品匀浆时加的 Trizol 试剂量太少。
匀浆后样品未在室温放置 5 分钟，会导致蛋白的析出不完全，也会增加 A280的数值。
***得到的 RNA 沉淀溶解不完全。
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上海朝瑞生物科技有限公司成立于2003-01-22，注册资本：700-1000万元。该公司服务型的公司。上海朝瑞科技是一家有限责任公司企业，一直“以人为本，服务于社会”的经营理念;“质量高速，诚守信誉，持续发展”的质量方针。以满足顾客要求为己任；以顾客永远满意为标准；以保持行业优先为目标，提供***的[ "科研技术服务", "应用技术服务", "科研成果转化", "科学产品销售" ]。上海朝瑞科技以创造***产品及服务的理念，打造高指标的服务，引导行业的发展。
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