紫外-可见吸收光谱为什么有些化合物是有色的，而另一些化合物却没有？共轭与颜色有什么关系？我们必须对光谱中可见光部分和附近的不同波长处的光吸收进行精确测量。商业光谱仪可对光谱中近紫外和可见部分光吸收进行精确测量。
可见光区域的光子能量为36-72kcal/mol，近紫外线区域（至200nm）的能量范围扩展至143kcal/mole。波长小于200nm的紫外线辐射难以处理，因此很少用作结构分析的常规工具，食品安全紫外可见分光光度计性价比。
当一束光照射物质时，上述能量会激发分子电子至更高能量的轨道。下图显示了有机分子中发生的各种电子激发的示意图，其包含六个跃迁。通常，只有三个低能量跃迁是通过200至800nm光的能量实现的，也就是说，能够吸收200-800nm区域光的分子应具有π电子系统和具有未成对电子对的杂原子。这种吸光基团称为生色团。
当样品分子暴露于具有与分子内可能的电子跃迁相匹配能量的光时，电子受光子激发从高的占据分子轨道（HOMO）跃迁到低的未占据分子轨道（LUMO），一些光能将被吸收，所产生的物质称为激发态物质，食品安全紫外可见分光光度计性价比。光谱仪记录吸收波长以及每个波长的吸收程度，食品安全紫外可见分光光度计性价比，所得光谱用吸光度（A）与波长的关系图表示。吸光度通常在0（无吸收）到2（99％吸收）的范围内。 紫外可见分光光度计是实验室中出镜率相当高的分析仪器。食品安全紫外可见分光光度计性价比
两者有所同，又有所不同。定量分析的原则同，而测量所需的光能量不同：
原子吸收为X射线，能量大，可激发电子从低的原子轨道向高的原子轨道跃迁.
紫外可见吸收为紫外光及可见光，能量小，只能激发电子从分子轨道向MAX低（或次低）的空的分子轨道跃迁。
通俗的说，原子吸收分光光度计是用较高的温度来燃烧分子，使之原子化（变为基态原子），再通过特征辐射，把基态原子激发，并吸收能量，通过这个能量差（透过率）来计算出浓度。而紫外—可见分光光度计是通过显色剂（一种能和我们被测元素产生络合反应的分子），与我们的被测元素产生反应，并且反应物分子带有特定的颜色，经过分子吸收氘灯（紫外区）或钨灯（可见区）的照射，吸收灯发射的能量，通过能量差（透过率）来计算出浓度。原子吸收分光光度计与紫外可见分光光度计的区别介绍
原理：
原子吸收观察的是构成物质的元素（原子）中的电子在原子轨道中的跃迁，属于原子吸收.
紫外可见光吸收观察的是构成物质的分子中的电子在分子轨道中的跃迁，属于分子吸收.
能量: 元素紫外可见分光光度计对比紫外分光光度计一般覆盖190nm和380nm波长，通常利用氘灯照明。
定性定量。利用特定的吸收峰，快速对待测样品进行定性和定量分析。如聚六亚甲基双胍盐酸盐的检测。利用双波长，以很快的速度辨别是单胍还是双胍，并进行粗略定量。这是液相色谱无论如何也做不到的。
杂质的检测。通过前处理将杂质与主成分分离后，进行紫外分光光度测定，可很快得到该杂质的含量。以桑普实验室这十几年对苯氧乙醇中杂质苯酚的测定方法改进过程为
之后建立了4-氨基安替比林比色法，可实现对苯氧乙醇含量20、40、60、80、100ppm的区分；紫外分光光度法
期间同时采用EP中紫外分光光度法，并将其进行适当改进，作为修订后的企标。该方法便利快速，可实现50ppm以上的定量检测。HPLC-DAD
近两年，桑普对产品品质把控更严格，希望能实现几个ppm的定量检测。所以采用了HPLC-DAD作为企标对其检测。
测定透过率。透光率是一个物理词汇，是表示光线透过介质的的能力，是透过透明或半透明物体的光通量与其入射光通量的百分率。吸光度与透过率的换算公式
透过率对于某些原料检测是非常实用的，可对此类原料品质进行总体把控。
双光束型则是通过一个斩光轮（mirroredchopperwheel）将一束光分成两束，分别测量对照样品和实际样品。可MIN光漂移（lampdrift）和减少测量时间。一些双光型光度计不利用斩光轮，而是利用一种光束分光器来代替，将一束光分成两束平行的光然后同时测量对照样品和目的样品。因为增加了测量的速度，所以双光束分光光度计在测量一些溶液随时间动态变化的研究中大有用处。光学构造（OPTICALCONFIGURATION）一般来说，紫外光分光光度计分为单光束和双光束两类。顾名思义，单光束型主要是依赖单束光进行测量。一束给定波长的光通过对照物，然后再通过实际样品溶液，就能得到吸光结果。 紫外可见分光光度计应用也有一定的局限性。
测定时除另有规定外，应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照，采用1cm石英吸收池，在规定的吸收峰±2nm以内，测几个点的吸收度或由仪器在规定的波长附近自动扫描测定，以核对供试品的吸收峰位置是否正确，并以吸收度MAX的波长作为测定波长，除另有规定外吸收度MAX波长应在该品种项下规定的测定波长±2nm以内。
供试品应取2份，如为对照品比较法，对照品一般也应取2份。平行操作，每份结果对平均值的偏差应在±0.5%以内。
选用仪器的狭缝宽度应小于供试品吸收带的半宽度，否则测得的吸收度值会偏低，狭缝宽度的选择应以减少狭缝宽度时供试品的吸收度不再增加为准，对于大部分被测品种，可以使用2nm缝宽。
使用紫外可见分光光度计时需要注意哪些方面？
使用的吸收池必须洁净，并注意配对使用。量瓶、移液吸管均应校正、洗净后使用。
取吸收池时，手指应拿毛玻璃面的两侧，装盛样品以池体的4/5为度，使用挥发性溶液时应加盖，透光面要用擦镜纸由上而下擦拭干净，检视应无溶剂残留。吸收池放入样品室时应注意方向相同。用后用溶剂或水冲洗干净，晾干防尘保存。
供试品溶液浓度除各该品种已有注明外，其吸收度以在0.3～0.7之间为宜。 紫外可见分光光度计在分析化学中的应用未能引起重视。常见紫外可见分光光度计排行
实验室研究人员希望省钱购入专门仪器定量核酸、蛋白或者细菌的生长情况。食品安全紫外可见分光光度计性价比
波长小于200nm的紫外光会被空气吸收，只能在真空中传播，因此称为真空紫外(VUV)。因此，普通的UV-Vis吸收光谱仪不能测量200nm以下的信号。
如果要测量VUV波段光谱，需要保持光路真空，光谱仪结构会更加复杂，也更加昂贵。
①单光束UV：传统的紫外，单光源发射单光束，全程密闭，通过光栅，照射样品，由光电倍增管监测器检测。
缺点：测完空白再测试样品，全波段分析时间较长（一般2min）。
②比例双光束UV：单光源单光束，全程密闭，通过光栅，加入棱镜，把光分为两束，分别照射样品与空白，再合并光，进入光电倍增管检测器，通过差减法计算结果。
好处：空白样品同时检测。
缺点：灵敏度下降，全波段分析时间较长 食品安全紫外可见分光光度计性价比
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